使用固相萃取儀時(shí)的注意事項
發(fā)布于 2023/02/15閱讀(709)來(lái)源 ltrlw
摘要
使用固相萃取儀時(shí)的注意事項
內容
我們在用固相萃取儀時(shí)，面臨的一個(gè)問(wèn)題就是:液體應該以什么速率過(guò)柱流出，我的經(jīng)驗是，要想效果好，就要慢，盡量慢。.
對于固相萃取儀柱中的填料，我們如果局部放大地看，能夠看到其實(shí)它們是有很多的空際，液體流通的渠道很多，如果流得快，相當比例的待測組分還來(lái)不及與填料充分作用就地從通道流失;所以要慢，給它們一個(gè)充分作用的機會(huì )。
如何慢呢?一個(gè)竅門(mén)就是不要用配合抽氣機使用的所謂固相萃取儀器，而采用再普通不過(guò)的重力法。利用重力的作用使液體向下流出。在實(shí)驗速度上，重力法遠不如吸力法，但是在實(shí)驗效果方面，重力法遠比吸力法優(yōu)勝，用吸力法只能得到譜帶吸附，用重力法卻能得到柱頭吸附，在速度和效果兩者的平衡中，我們還是傾向于優(yōu)先保證好的效果。
舉例來(lái)說(shuō)，一個(gè)3ml500mg的C18小柱，如果加甲醇活化，其甲醇全部流至篩板時(shí)間約為20分鐘，而在過(guò)樣品液時(shí)，25ml 的液體*多2小時(shí)可以流完，而且用重力法如果得當，工作速率不比吸力法差很多。因為我們可以充分利用空閑時(shí)間，用吸力法*須有人在旁邊守候，而重力法由于不需要用電，可以充分利用午休和晚上時(shí)間過(guò)柱，液體量大時(shí)接個(gè)堆疊接頭和延長(cháng)管即可，安排好實(shí)驗步驟，工作效率一樣很高。另外，重力法不需要抽氣機和固相萃取儀器。
在固相萃取儀條件選擇上，有人為了提高提取效率，盡量多加液體，或選擇填料量大的小柱，我覺(jué)得大可不*如此。尤其在用重力法時(shí)，由于效率高，很多情況下是柱頭吸附，并不是所有的填料都在起作用，填料多了不僅液體流出速度會(huì )更慢，而且在洗脫時(shí)的擴散會(huì )很明顯。
因此建議，夠用就行，在能保證效率時(shí)，填料盡量少，加液也不宜多。
固相萃取儀從原理上是色譜分離，但是在操作時(shí)*好只把它作為吸附萃取劑使用，由于填料性質(zhì)、松緊常有差異，因此在實(shí)際實(shí)驗中不*因為追求效果的*佳化而設計出很復雜的洗脫程序。
在建立條件中，我們應該盡量多利用現成的資料，盡快地建立起體系，同時(shí)要對操作過(guò)于復雜的步驟保持警惕性，在實(shí)驗效果，實(shí)驗速率和易操作性三者中取得平衡點(diǎn)。
固相萃取柱*好只用一.次。因為從嚴格的意義上來(lái)說(shuō)，很多物質(zhì)的吸附是不可逆的，一次吸附， 無(wú)法洗脫，影響著(zhù)下一次吸附，雖然有人做過(guò)重復利用的實(shí)驗，但是總體來(lái)說(shuō)為了節省- -點(diǎn)經(jīng)費而大大增加了結果的不可靠性和不確定性，是很不合算的行為。
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